条件性ZIKV-NS2A过表达小鼠模型

寨卡病毒（ZIKV）属于属黄病毒科黄病毒属，病毒颗粒呈球形，直径40-70nm。孕妇感染可导致ZIKA综合征，造成新生儿的小头畸形；成人感染还可导致格林-巴利综合征。寨卡病毒是单股正链RNA病毒，基因组长约10.8kb，含一条单一开放读码框。病毒蛋白由一个单一的多蛋白前体，经宿主蛋白酶和病毒蛋白酶切而成，包括3个结构蛋白（C、prM/M、E）和7个非结构蛋白（NS1、NS2A、NS2B、NS3、NS4A、NS4B、NS5）。非结构蛋白具有丝氨酸蛋白么、RNA解旋酶和RNA依赖RNA聚合酶功能。寨卡病毒主要通过病毒感染的伊蚊类蚊媒叮咬传播；亦可通过母婴传播，包括宫内感染和分娩时感染；也可通过输血和性传播。寨卡病毒感染的潜伏期数日至一周，约20%感染者出现临床症状，典型病症表现为：急性发热伴斑丘疹、关节痛或结膜炎、肌痛和头痛。临床表现一般较轻，持续数天至一周，重症病例少见，病死率极低。但是孕妇在妊娠期感染寨卡病毒可能会引起胎儿先天性小头畸形或胎死宫内。寨卡病毒粒子组装的分子机制在很大程度上是未知的。有研究表明，ZIKV NS2A在招募病毒RNA、结构蛋白prM/E和病毒NS2B/NS3蛋白酶到病毒粒子组装位点并协调病毒粒子形态形成方面发挥了核心作用。一种破坏这些相互作用的突变不会显著影响病毒RNA复制，但会选择性地破坏病毒粒子的组装，表明了这些相互作用在病毒形态发生中的特定作用。研究还发现，ZIKV RNA的3'UTR可能作为一种“招募信号”，通过与NS2A结合进入病毒粒子的组装位点。在病毒粒子组装位点C-prM-E协调切割后，NS2A可能将病毒RNA呈递给C蛋白形成核衣壳，然后被prM/E蛋白包膜。

F0代构建：

ZIKV NS2A在招募病毒RNA、结构蛋白prM/E和病毒NS2B/NS3蛋白酶到病毒粒子组装位点并协调病毒粒子形态形成方面发挥了核心作用，是寨卡病毒粒子组装的重要功能分子。

PVM为低于人间传染病名录三级安全风险的病原，人类感染的风险低，但不排除对免疫功能缺陷者的致病性。

PVM是啮齿类实验动物必须排除的病原体，对动物有致病性。会干扰其他实验研究。

鉴于此，此感染实验必须在BSL-2级以上的生物安全实验室进行病原学实验，在ABSL-2实验室进行动物实验。

１. 病毒滴度的变化：接种病毒后，动物肺组织PVM RT-PCR检测可检出病毒，病毒滴度在感染后３天达到高峰，并可维持至７日，随后滴度下降。

２. 感染动物体重较之未感染动物体重下降，动物多出现竖毛，弓背等症状。严重者体重下降，行动出现迟缓，耳及尾可见紫绀，震颤，处于濒死状态。用于药效评价实验时，应控制感染剂量，降低因感染出现的急性死亡（４日内）。６~７日的死亡率可作为药效评价的指标。

３. 病理损伤以充血、出血、肺组织水肿以及炎细胞浸润为标准，应测定肺间隔，以及肺通气水平，进而评估肺呼吸能力。

４. 炎症因子重点关注IL-1β，IL-6，IL-18，MCP-1，IFN-γ等。

进行人类RSV 肺炎感染研究，国内外推荐使用PVM做替代实验。PVM的毒株不同，实验动物的品系不同，动物的临床表型也会存在差异。本模型的表型与国外进行的模型研究表型相似，在急性期的死亡率较低，有较长的临床治疗的窗口，可用于免疫治疗的疗效评价。